Optimización de la producción de proteínas recombinantes del virus de la leucemia bovina en células S2 de Drosophila con enfoque al escalado del proceso
Supervisor(es): Olivero Deibe, Natalia - Carrión Runco, Federico Daniel
Resumen:
El siguiente proyecto se centra en la optimización de la producción y caracterización de una proteína recombinante del virus de la leucemia bovina (VLB), un retrovirus oncogénico responsable de la leucosis bovina enzoótica, enfermedad que afecta significativamente al ganado lechero y genera importantes pérdidas económicas. Dada la elevada prevalencia del VLB en Uruguay, superior al 80%, resulta necesario desarrollar nuevas herramientas para su control, incluyendo vacunas eficaces y métodos diagnósticos más sensibles. En este contexto, el Laboratorio de Inmunovirología del Instituto Pasteur desarrolló una estrategia basada en la expresión soluble del ectodominio de la glicoproteína de envoltura (Env) del VLB en células S2 de Drosophila melanogaster. Esta proteína constituye un blanco de interés debido a su elevada inmunogenicidad y potencial aplicación tanto en diagnóstico como en inmunización. Para ello, se empleó una línea celular estable e inducible capaz de producir una versión recombinante de la proteína con modificaciones destinadas a mejorar su estabilidad estructural y facilitar su purificación. El trabajo incluyó la evaluación del crecimiento celular en distintas condiciones de cultivo, la inducción de la expresión proteica mediante CdCl₂ y la purificación de la proteína utilizando cromatografía de afinidad. Posteriormente, se realizaron estudios biofísicos y bioquímicos para determinar su estado oligomérico, homogeneidad y estabilidad térmica mediante diversas técnicas analíticas. Asimismo, se exploraron condiciones de escalado en biorreactor, evaluando el crecimiento celular y el uso de antiespumantes. Los resultados obtenidos demuestran la viabilidad de producir y purificar la proteína EctoEnvFm conservando sus propiedades estructurales, posicionando al sistema de células S2 como una plataforma prometedora para aplicaciones diagnósticas e inmunológicas a mayor escala.
| 2026 | |
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PROYECTOS-BI PROYECTOS-BI PROTEÍNA RECOMBINANTE |
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| Español | |
| Universidad ORT Uruguay | |
| RAD | |
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https://hdl.handle.net/20.500.11968/7910
http://hdl.handle.net/20.500.11968/7910 |
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| Acceso abierto | |
| Acceso abierto |