En el experimento I, se estudió el efecto de la paridad (primíparas vs multíparas) sobre el perfil endócrino-metabólico y en términos de recuento de leucocitos durante el período periparto, en 32 vacas lecheras en pastoreo. La condición corporal (CC), y las concentraciones de ácidos grasos no esterificados (NEFA), β-hidroxibutirato (BHB), colesterol, proteína total, albúmina, calcio, insulina, IGF-I, leptina, adiponectina y el recuento total y diferencial de glóbulos blancos, fueron determinados durante el periparto. Los datos se analizaron con el procedimiento mixto incluyendo en el modelo estadístico la paridad, período e interacción. Las vacas primíparas tuvieron una disminución más pronunciada de CC que las vacas multíparas y produjeron menos leche que las vacas multíparas. Las vacas primíparas tuvieron una mayor concentración de NEFA durante el período en estudio. Las vacas multíparas tuvieron una concentración de proteína total más alta antes del parto y una concentración de calcio más baja en el posparto. Las concentraciones hormonales disminuyeron alrededor del parto. Las vacas primíparas presentaron un descenso más pronunciado de IGF-I alrededor del parto que las vacas multíparas. El recuento total de leucocitos fue más bajo en la primera semana posparto pero no se encontró efecto de la paridad. El balance energético negativo (BEN) reflejado a través de la evolución de la CC, los perfiles endócrinos y metabólicos durante el periparto de vacas lecheras en sistema mixto de alimentación, se asoció con una disminución del recuento de células del sistema inmune innato y adquirido. Las observaciones en el perfil endócrino-metabólico mostraron un perfil más desequilibrado en vacas primíparas en comparación con sus homólogas multíparas, lo que indica un desequilibrio energético más pronunciado en esta categoría. Sin embargo, el desequilibrio energético en las vacas primíparas no se visualizó en el recuento de leucocitos circulantes, lo que denota que la paridad no afectó dichas variables. El objetivo del experimento II fue describir el efecto de la etapa de lactancia (lactancia temprana vs lactancia media) sobre la funcionalidad de las células mononucleares de sangre periférica (PBMC) en términos de respuesta de factor de necrosis tumoral-alfa (TNF-α), en vacas lecheras en pastoreo, no gestantes, desafiadas in vitro con Escherichia coli. Se recogió sangre periférica a los 14 ± 4 días después del parto (grupo de lactancia temprana, n= 9) y a los 123 ± 31 días después del parto (grupo de lactancia media, n= 9). Las PBMC se cultivaron conjuntamente con el suero autólogo ó suero fetal bovino. La maduración de las PBMC fue inducida por estimulación bacteriana mediante la adición de E. coli irradiada con UV proveniente de un caso de mastitis clínica. Las concentraciones de TNF-α en los sobrenadantes de los cultivo se analizaron por el procedimiento mixto, incluyendo en el modelo estadístico el grupo (lactancia temprana vs lactancia media), suero (suero autólogo vs suero fetal bovino), tiempo y sus interacciones. La respuesta de TNF-α después de la exposición a E. coli fue mayor y más rápida en la lactancia temprana que en las vacas de media lactancia, cuando las PBMC se cultivaron conjuntamente en suero autólogo. En contraste, no se observaron diferencias entre los grupos cuando las células se cultivaron conjuntamente con suero fetal bovino. Estos datos sugieren, que la etapa de lactancia y el tipo de suero juegan un papel importante en la capacidad de respuesta de las PBMC en términos de producción de TNF-α.