La resistencia a antimicrobianos (RAM) constituye una de las principales amenazas para la salud pública, con implicancias directas en la medicina humana, veterinaria y ambiental. Las cefalosporinas de tercera generacion (C3G) se encuentran entre los antibioticos de importancia critica para la medicina humana segun la OMS, y su eficacia se ve comprometida por la produccion de β-lactamasas de espectro extendido (BLEE) y cefalosporinasas tipo AmpC. En Uruguay, se han reportado enterobacterias productoras de BLEE (blaCTX-M-15, blaCTX-M-55, blaCTX-M-2, blaCTX-M-8, blaCTX-M-14) y AmpC (blaCMY-2) en aislamientos de humanos, caninos, aves, cerdos, bovinos y equinos, aunque no existian antecedentes publicados en felinos a nivel nacional. El presente estudio tuvo como objetivo determinar la presencia y caracterizar los mecanismos de resistencia a C3G en Escherichia coli aisladas de gatos atendidos en el Hospital de la Facultad de Veterinaria (UdelaR). Se muestrearon 50 gatos mediante hisopados rectales (julio - noviembre 2023). Los aislamientos resistentes a ceftriaxona fueron identificados por MALDI-TOF y evaluados mediante antibiograma y pruebas de sinergia. Se realizo la busqueda de genes de resistencia (blaCTX-M, blaCMY, qnr) mediante PCR, y la evaluacion de la movilidad de los mismos mediante ensayos de conjugacion. Se detectaron E. coli resistentes a C3G en 15/50 gatos (30%), de los cuales la mayoria (13/15) se encontraba bajo tratamiento antibiotico. Se observo resistencia concomitante a multiples antimicrobianos, incluidas fluoroquinolonas, aminoglucosidos y tetraciclinas. Once aislamientos presentaron sinergia positiva para BLEE y cuatro para AmpC. Mediante PCR se identificaron blaCTX-M-grupo1 (5/11), blaCTXM- grupo2 (3/11), blaCTX-M-grupo8 (3/11) y blaCMY (4/4). Cuatro cepas portaron genes qnr en combinacion con genes de BLEE. En 12/15 aislamientos se confirmó la transferencia de genes de RAM por conjugacion. Estos hallazgos evidencian la circulacion de genes de resistencia transferibles en E. coli de gatos en Uruguay. Dado el estrecho vínculo de los felinos con los humanos, la presencia de BLEE, AmpC y genes de resistencia a quinolonas con capacidad de diseminacion reafirma la importancia de monitorear a los animales de compania bajo el enfoque de “Una Salud”.