El objetivo del presente trabajo fue determinar el efecto de la alimentación a los 47±12 días posparto (DPP) en vacas sometidas a un sistema mixto, basado en el uso de dieta totalmente mezclada (DTM) y distintas estrategias de pastoreo vs. DTM exclusivamente sobre el perfil de ácidos grasos (AG) en leche. Se seleccionaron vacas Holstein multíparas (n= 27) que fueron bloqueadas acorde a la fecha probable de parto, paridad y condición corporal y asignadas a tres manejos nutricionales desde el parto por 60 DPP: alimentación ad libitum con DTM exclusivamente (G0; n=9), DTM y 6 h de acceso al pastoreo en una sesión (G1; n=10) o DTM y 9 h de acceso al pastoreo en dos sesiones (G2; n=8). Los tres tratamientos accedieron a la misma oferta de materia seca (MS) diaria, lo que difirió fue la fuente (DTMpastoreo vs. DTM); para los grupos G1 y G2 la dieta ofrecida fue 50% de la pastura y 50% DTM y difirieron únicamente en el tiempo de pastoreo (6 vs. 9 h). Ofertando un 50% de la dieta a partir de pasturas desde el inicio de la lactancia, se logró modificar el perfil de AG de la leche, incrementándose aquellas fracciones que son de interés para la salud humana. A su vez, el incremento en el consumo de pasto mediante un aumento en las horas de pastoreo modificó el perfil de AG mejorando aún más desde un punto de vista saludable.