"Determinación del efecto in vitro de la carbetocina (CB) y/o del dimetilsulfóxido (DMSO), sobre la actividad de colagenasas en cérvix de ovejas en fase folicular"
Supervisor(es): Rodríguez Piñon, Marcelo - García Barcelo, Gonzalo
Resumen:
La inseminación artificial transcervical en la especie ovina está limitada por la estrechez del cérvix. En la dilatación cervical participan enzimas que degradan la matriz extracelular (Metaloproteinasas de la Matriz extracelular o MMPs), en especial las MMP-2 y MMP-9. La actividad de las mismas es dependiente de hormonas (Estrógenos, Oxitocina) y factores inflamatorios (Prostaglandinas, Estrógenos, Radicales libres), entre otros. Experimentos previos in vivo e in vitro mostraron evidencias de que la Carbetocina (Cb, análogo sintético de la Oxitocina) y el Dimetilsulfóxido (DMSO) podrían actuar en forma aditiva/sinérgica sobre la actividad de la MMP-2. En esta Tesis se propone estudiar el efecto de dosis crecientes de DMSO (0, 0.25, 0.5, 1.0 y 2.0 %) en presencia o no de Cb (100 ng/ml) sobre la actividad enzimática de las formas Activada (A) y Latente (L) de las MMP-2 y 9 en cérvix ovino, determinada mediante zimografía en gelatina SDS-PAGE. La actividad de las formas A y L y la relación A/L de MMP fueron analizadas mediante test no paramétricos. Los datos fueron analizados mediante el test de Wilcoxon para muestras pareadas para detectar los efectos de la zona cervical (craneal y caudal) y para el efecto de la Cb (con o sin Cb) y mediante el Test de Friedman con un test posterior de Dunn´s para muestras pareadas, para detectar el efecto de las diferentes dosis de DMSO utilizadas; Para el caso de las interacciones se utilizó el programa GraphPad Prism 10. La actividad de la forma A y L de la MMP-9 fue escasa y esporádica, en un 19,4% de las muestras analizadas. En cambio, la actividad de la forma L de la MMP- 2 fue afectada tanto por la zona cervical, la dosis de DMSO, la presencia de Cb y por las interacciones entre ellos. Se destaca que la actividad de L MMP-2 fue mayor con las dosis de DMSO de 0.5 a 2%, respecto al control no tratado y en presencia de Cb. La actividad de la forma A fue afectada solo por el tratamiento con DMSO, siendo mayor respecto al control no tratado a dosis de 1%. La relación entre las formas A y L de la MMP-2 (Rel A/L) fue afectada por la zona cervical y por el tratamiento con DMSO, destacándose que la Rel A/L de la MMP-2 fue menor en el tratamiento con DMSO 1% respecto al control no tratado. En conclusión, los resultados permiten consolidar el concepto de que la actividad de la MMP-2 predomina respecto a la de la MMP-9 en las modificaciones de la matriz extracelular cervical en ovejas en fase folicular y aportan evidencias para investigar el potencial uso del DMSO y su asociación con Cb como agente farmacológico para facilitar la penetrabilidad cervical al momento de la IA en ovinos.
| 2024 | |
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OVINOS OVEJAS INSEMINACION ARTIFICIAL CUELLO UTERINO |
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| Español | |
| Universidad de la República | |
| COLIBRI | |
| https://hdl.handle.net/20.500.12008/47288 | |
| Acceso abierto | |
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