El estrecho relacionamiento entre los humanos y sus animales de compañía en el mundo actual ha provocado que participen más en la rutina diaria de los tutores y en consecuencia estén más expuestos a situaciones estresantes, como lo es el transporte en vehículo. Se han empleado diferentes tratamientos y herramientas para mitigar la respuesta al estrés en perros, entre ellos, el uso de cannabidiol (CBD). El objetivo de este trabajo fue determinar si la administración oral de una solución con CBD al 5% influye en la respuesta de estrés generada por el transporte terrestre en perros. Se utilizaron 24 perros adultos, distribuidos aleatoriamente en dos grupos: un grupo tratado con una única dosis de CBD de 2 mg/kg y un grupo control que recibió una única dosis del vehículo (aceite). El tratamiento se administró por vía oral, en ayunas, una hora antes de realizar un traslado en camioneta de 20 minutos de duración. La respuesta al transporte se evaluó mediante indicadores hormonales (cortisol sérico), fisiológicos (frecuencia cardíaca, frecuencia respiratoria y temperatura superficial) y bioquímicos (glucosa, albúmina, globulinas y proteínas totales), registrándose en distintos momentos antes y después del viaje. Los resultados mostraron que los perros tratados con CBD presentaron un menor incremento en la concentración sérica de cortisol, así como aumentos más atenuados en la frecuencia cardíaca y la temperatura perianal en comparación con el grupo control, mientras que no se observaron diferencias significativas en los parámetros bioquímicos analizados. En conclusión, este trabajo constituye el primer reporte en demostrar que la administración oral de 2 mg/kg de cannabidiol (CBD), administrado en ayunas una hora antes de un traslado terrestre breve (20 minutos), contribuyó a mitigar la respuesta de estrés inducida por el transporte, lo que sugiere un potencial beneficio para el bienestar de los perros expuestos a estas situaciones cotidianas.