Este trabajo consistió en el aislamiento, identificación y determinación de resistencia a antimicrobianos de cepas de Enterobacterias, que partieron de muestras de necropsia de un ejemplar juvenil de León marino (Otaria byronia) proveniente de Isla de Lobos, Uruguay. Se tomaron hisopados de laringe, esófago, tráquea, duodeno y vejiga. De un total de cinco cepas Gram negativas aisladas, se identificaron dos especies bacterianas correspondiendo a Escherichia ferrusoni y a Proteus mirabilis. Este es el primer reporte de Escherichia ferrusoni en Otaria byronia hasta la fecha. Todos los aislamientos expresaron fenotipo de resistencia a Amoxicilina/clavulámico, Sulfa-trimetoprim, Tetraciclina, Doxiciclina y Estreptomicina, tres de las cinco cepas aisladas mostraron resistencia contra Ciprofloxacina y dos contra Enrofloxacina y Cefovecina. Estos resultados brindan información básica sobre la presencia cepas bacterianas resistentes a antimicrobianos en mamíferos marinos, siendo el primer reporte de este tipo para nuestro país.