Informe final del proyecto: Desarrollo de un test inmunocromatográfico rápido para la detección de uropatógenos y betalactamasas de espectro extendido en orina

Robino Picon, Maria Luciana - Scavone Guillermo, Paola - Moreno Jauge, María - González Candia, María José - Mónaco Patiño, Amy Elizabeth - Da Cunda Silva Y Monti, María Paula

Resumen:

Las Infecciones del Tracto Urinario (ITU) son un problema frecuente. Escherichia coli es el principal agente etiológico, seguido por Staphylococcus saprophyticus, Klebsiella pneumoniae y Proteus mirabilis. La técnica de oro para el diagnóstico de ITU es el urocultivo, pero su resultado demora al menos 48h. La tira reactiva de orina (TRO) se utiliza como test rápido de tamizaje para ITU. La desventaja es su baja sensibilidad (41-64% para nitritos y 48-86% para leucocitos) y especificidad variable (82-98%), lo cual conduce en muchos casos a diagnósticos incorrectos y al uso inapropiado de antimicrobianos. El objetivo del estudio fue desarrollar un test inmunocromatográfico (TI) rápido para la detección de los uropatógenos más frecuentes en orina. A su vez, nos propusimos evaluar un formato comercial de TI para detectar E. coli en orina y evaluar su rendimiento en muestras clínicas de pacientes con sospecha de ITU. Se evaluaron y seleccionaron diferentes anticuerpos comerciales para la detección de los distintos uropatógenos mediante ELISA. Se desarrollaron los TI de producción propia para cada uropatógeno y se puso a punto el test comercial con formato universal utilizando el par de Ac anti E. coli seleccionado previamente. Para la validación del test se analizaron 161 muestras de orina de pacientes con sospecha de ITU y se comparó su resultado con el del urocultivo. Si bien se consiguió desarrollar un prototipo de TI que funcionó para la detección de los patógenos evaluados, su interpretación presentó dificultades visuales, por lo cual se procedió a utilizar el TI comercial que presentó mejor especificidad, valor predictivo positivo y precisión diagnóstica que la TRO. La combinación de ambas técnicas (TRO más TI) como método de tamizaje presenta una excelente sensibilidad (94%) y precisión diagnóstica (80%), representando una buena y rápida estrategia alternativa para los urocultivos.


Detalles Bibliográficos
2021
Agencia Nacional de Investigación e Innovación
Microbiología
Test inmunocromatográfico
Infección urinaria
Test diagnóstico
Ciencias Médicas y de la Salud
Biotecnología de la Salud
Biotecnología relacionada con la Salud
Español
Agencia Nacional de Investigación e Innovación
REDI
https://hdl.handle.net/20.500.12381/533
Acceso abierto
Reconocimiento 4.0 Internacional. (CC BY)
Resumen:
Sumario:Las Infecciones del Tracto Urinario (ITU) son un problema frecuente. Escherichia coli es el principal agente etiológico, seguido por Staphylococcus saprophyticus, Klebsiella pneumoniae y Proteus mirabilis. La técnica de oro para el diagnóstico de ITU es el urocultivo, pero su resultado demora al menos 48h. La tira reactiva de orina (TRO) se utiliza como test rápido de tamizaje para ITU. La desventaja es su baja sensibilidad (41-64% para nitritos y 48-86% para leucocitos) y especificidad variable (82-98%), lo cual conduce en muchos casos a diagnósticos incorrectos y al uso inapropiado de antimicrobianos. El objetivo del estudio fue desarrollar un test inmunocromatográfico (TI) rápido para la detección de los uropatógenos más frecuentes en orina. A su vez, nos propusimos evaluar un formato comercial de TI para detectar E. coli en orina y evaluar su rendimiento en muestras clínicas de pacientes con sospecha de ITU. Se evaluaron y seleccionaron diferentes anticuerpos comerciales para la detección de los distintos uropatógenos mediante ELISA. Se desarrollaron los TI de producción propia para cada uropatógeno y se puso a punto el test comercial con formato universal utilizando el par de Ac anti E. coli seleccionado previamente. Para la validación del test se analizaron 161 muestras de orina de pacientes con sospecha de ITU y se comparó su resultado con el del urocultivo. Si bien se consiguió desarrollar un prototipo de TI que funcionó para la detección de los patógenos evaluados, su interpretación presentó dificultades visuales, por lo cual se procedió a utilizar el TI comercial que presentó mejor especificidad, valor predictivo positivo y precisión diagnóstica que la TRO. La combinación de ambas técnicas (TRO más TI) como método de tamizaje presenta una excelente sensibilidad (94%) y precisión diagnóstica (80%), representando una buena y rápida estrategia alternativa para los urocultivos.