Optimización de la producción de un fragmento de leucotoxina recombinante

Demarco Guareschi, Ornella

Supervisor(es): Reolon Baratta, Eduardo Enrique - Tucci Pi, Paula Isabel

Resumen:

En este trabajo, el objetivo principal fue producir un antígeno recombinante para incorporar en una nueva vacuna contra la enfermedad del tracto respiratorio bovino (ERB), utilizando un criterio industrial basado en la reducción de costos de producción. Dicho desafío fue planteado por la empresa Virbac Uruguay y se desarrolló en la planta piloto de laboratorios Celsius. Se decidió trabajar con un fragmento de la proteína leucotoxina de Mannheimia haemolytica (FLKT), la bacteria más patógena y comúnmente asociada con la ERB. Se optimizó la expresión de la FLKT recombinante, previo a las etapas de escalado industrial, para mejorar el rendimiento volumétrico. La optimización se realizó, por un lado, a nivel de los componentes del medio de cultivo y los parámetros de la fermentación, con el objetivo de aumentar la biomasa producida y el nivel de expresión de la FLKT. Por otro lado, se analizaron distintas estrategias de lisis celular, empleando disrupción, lisis química, y la combinación de las dos. Se logró optimizar la expresión de la FLKT recombinante en un reactor piloto, luego de poner a punto la concentración inicial de glucosa y alimentando el cultivo de una fuente de nitrógeno. Como resultado de la estrategia de optimización realizada durante esta tesis se escaló el protocolo de laboratorio a la escala piloto, a la vez que se obtuvo un rendimiento del proceso más de 3 veces superior al obtenido inicialmente, lo que permite viabilizar la producción industrial de esta proteína.

Detalles Bibliográficos
2016
PROYECTOS-BI
ENFERMEDADES DEL TRACTO RESPIRATORIO
PROTEÍNAS
TOXINAS MICROBIANAS
VACUNAS
GANADO
Español
Universidad ORT Uruguay
RAD
http://hdl.handle.net/20.500.11968/3727
Acceso abierto
_version_ 1878917301535768576
author Demarco Guareschi, Ornella
author_facet Demarco Guareschi, Ornella
author_role author
bitstream.checksum.fl_str_mv fa55bb0567e84487140d64abd1295b3f
bde8babae8cd767f4d4d54068ee8358e
39ef0cc14d0059ac9e1388655ce9f420
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
MD5
MD5
bitstream.url.fl_str_mv https://rad.ort.edu.uy/bitstreams/e98906a6-2400-4264-8055-739e093835b2/download
https://rad.ort.edu.uy/bitstreams/016a5809-2f07-43f6-93fe-80b5c1bd5c02/download
https://rad.ort.edu.uy/bitstreams/b422ab53-e5bb-4a6f-b932-d8d132396a16/download
collection RAD
dc.contributor.tribunal.es.fl_str_mv Grotiuz Scarella, Adolfo German
Sanguinetti Acosta, Carlos Julio
dc.creator.advisor.none.fl_str_mv Reolon Baratta, Eduardo Enrique
Tucci Pi, Paula Isabel
dc.creator.none.fl_str_mv Demarco Guareschi, Ornella
dc.date.accessioned.none.fl_str_mv 2018-04-24T08:00:57Z
dc.date.available.none.fl_str_mv 2018-04-24T08:00:57Z
dc.date.issued.es.fl_str_mv 2016
dc.description.abstract.none.fl_txt_mv En este trabajo, el objetivo principal fue producir un antígeno recombinante para incorporar en una nueva vacuna contra la enfermedad del tracto respiratorio bovino (ERB), utilizando un criterio industrial basado en la reducción de costos de producción. Dicho desafío fue planteado por la empresa Virbac Uruguay y se desarrolló en la planta piloto de laboratorios Celsius. Se decidió trabajar con un fragmento de la proteína leucotoxina de Mannheimia haemolytica (FLKT), la bacteria más patógena y comúnmente asociada con la ERB. Se optimizó la expresión de la FLKT recombinante, previo a las etapas de escalado industrial, para mejorar el rendimiento volumétrico. La optimización se realizó, por un lado, a nivel de los componentes del medio de cultivo y los parámetros de la fermentación, con el objetivo de aumentar la biomasa producida y el nivel de expresión de la FLKT. Por otro lado, se analizaron distintas estrategias de lisis celular, empleando disrupción, lisis química, y la combinación de las dos. Se logró optimizar la expresión de la FLKT recombinante en un reactor piloto, luego de poner a punto la concentración inicial de glucosa y alimentando el cultivo de una fuente de nitrógeno. Como resultado de la estrategia de optimización realizada durante esta tesis se escaló el protocolo de laboratorio a la escala piloto, a la vez que se obtuvo un rendimiento del proceso más de 3 veces superior al obtenido inicialmente, lo que permite viabilizar la producción industrial de esta proteína.
dc.description.es.fl_txt_mv Incluye bibliografía, glosario y anexos
Vencimiento de confidencialidad: 20/04/2018.
dc.format.extent.es.fl_str_mv 63 p. il., tbls., grafs
dc.identifier.citation.es.fl_str_mv Demarco Guareschi, O. (2016). Optimización de la producción de un fragmento de leucotoxina recombinante (Trabajo de Grado). Universidad ORT Uruguay, Facultad de Ingeniería. Recuperado de https://rad.ort.edu.uy/handle/20.500.11968/3727
dc.identifier.uri.none.fl_str_mv http://hdl.handle.net/20.500.11968/3727
http://hdl.handle.net/20.500.11968/3727
dc.language.iso.none.fl_str_mv Español.
spa
dc.publisher.es.fl_str_mv Universidad ORT Uruguay
dc.relation.none.fl_str_mv https://bibliotecas.ort.edu.uy/bibid/83608
dc.rights.none.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
dc.source.none.fl_str_mv reponame:RAD
instname:Universidad ORT Uruguay
instacron:Universidad ORT
dc.subject.es.fl_str_mv PROYECTOS-BI
ENFERMEDADES DEL TRACTO RESPIRATORIO
PROTEÍNAS
TOXINAS MICROBIANAS
VACUNAS
GANADO
dc.title.none.fl_str_mv Optimización de la producción de un fragmento de leucotoxina recombinante
dc.type.es.fl_str_mv Trabajo final de carrera
dc.type.none.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/bachelorThesis
dc.type.version.none.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
description Incluye bibliografía, glosario y anexos
eu_rights_str_mv openAccess
format bachelorThesis
id RAD_b3ff75023f4bddf5f784c2f6b292a2fb
identifier_str_mv Demarco Guareschi, O. (2016). Optimización de la producción de un fragmento de leucotoxina recombinante (Trabajo de Grado). Universidad ORT Uruguay, Facultad de Ingeniería. Recuperado de https://rad.ort.edu.uy/handle/20.500.11968/3727
instacron_str Universidad ORT
institution Universidad ORT
instname_str Universidad ORT Uruguay
language spa
language_invalid_str_mv Español.
network_acronym_str RAD
network_name_str RAD
oai_identifier_str oai:rad.ort.edu.uy:20.500.11968/3727
publishDate 2016
reponame_str RAD
repository.mail.fl_str_mv rodriguez_v@ort.edu.uy
repository.name.fl_str_mv RAD - Universidad ORT Uruguay
repository_id_str 3927
spelling Grotiuz Scarella, Adolfo GermanSanguinetti Acosta, Carlos JulioDemarco Guareschi, OrnellaReolon Baratta, Eduardo EnriqueTucci Pi, Paula Isabel2018-04-24T08:00:57Z2018-04-24T08:00:57Z2016Demarco Guareschi, O. (2016). Optimización de la producción de un fragmento de leucotoxina recombinante (Trabajo de Grado). Universidad ORT Uruguay, Facultad de Ingeniería. Recuperado de https://rad.ort.edu.uy/handle/20.500.11968/3727http://hdl.handle.net/20.500.11968/3727http://hdl.handle.net/20.500.11968/3727Incluye bibliografía, glosario y anexosVencimiento de confidencialidad: 20/04/2018.En este trabajo, el objetivo principal fue producir un antígeno recombinante para incorporar en una nueva vacuna contra la enfermedad del tracto respiratorio bovino (ERB), utilizando un criterio industrial basado en la reducción de costos de producción. Dicho desafío fue planteado por la empresa Virbac Uruguay y se desarrolló en la planta piloto de laboratorios Celsius. Se decidió trabajar con un fragmento de la proteína leucotoxina de Mannheimia haemolytica (FLKT), la bacteria más patógena y comúnmente asociada con la ERB. Se optimizó la expresión de la FLKT recombinante, previo a las etapas de escalado industrial, para mejorar el rendimiento volumétrico. La optimización se realizó, por un lado, a nivel de los componentes del medio de cultivo y los parámetros de la fermentación, con el objetivo de aumentar la biomasa producida y el nivel de expresión de la FLKT. Por otro lado, se analizaron distintas estrategias de lisis celular, empleando disrupción, lisis química, y la combinación de las dos. Se logró optimizar la expresión de la FLKT recombinante en un reactor piloto, luego de poner a punto la concentración inicial de glucosa y alimentando el cultivo de una fuente de nitrógeno. Como resultado de la estrategia de optimización realizada durante esta tesis se escaló el protocolo de laboratorio a la escala piloto, a la vez que se obtuvo un rendimiento del proceso más de 3 veces superior al obtenido inicialmente, lo que permite viabilizar la producción industrial de esta proteína.63 p. il., tbls., grafsEspañol.spaUniversidad ORT UruguayPROYECTOS-BIENFERMEDADES DEL TRACTO RESPIRATORIOPROTEÍNASTOXINAS MICROBIANASVACUNASGANADOOptimización de la producción de un fragmento de leucotoxina recombinanteTrabajo final de carrerainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesishttps://bibliotecas.ort.edu.uy/bibid/83608reponame:RADinstname:Universidad ORT Uruguayinstacron:Universidad ORTinfo:eu-repo/semantics/openAccessFacultad de IngenieríaCarrera UniversitariaLicenciada en BiotecnologíaTrabajo de GradoTrabajo de Grado (Carrera Universitaria). Universidad ORT Uruguay, Facultad de IngenieríaFI - Licenciatura en Biotecnología - BITHUMBNAILMaterial completo.pdf.jpgWritten by FormatFilter org.dspace.app.mediafilter.PDFBoxThumbnail on 2024-07-22T19:15:52Z (GMT).Generated Thumbnailimage/jpeg3518https://rad.ort.edu.uy/bitstreams/e98906a6-2400-4264-8055-739e093835b2/downloadfa55bb0567e84487140d64abd1295b3fMD53ORIGINALMaterial completo.pdfDSpace Rest apidescriptionapplication/pdf1835035https://rad.ort.edu.uy/bitstreams/016a5809-2f07-43f6-93fe-80b5c1bd5c02/downloadbde8babae8cd767f4d4d54068ee8358eMD51TEXTMaterial completo.pdf.txtWritten by FormatFilter org.dspace.app.mediafilter.TikaTextExtractionFilter on 2026-07-11T06:50:49Z (GMT).Extracted texttext/plain101974https://rad.ort.edu.uy/bitstreams/b422ab53-e5bb-4a6f-b932-d8d132396a16/download39ef0cc14d0059ac9e1388655ce9f420MD5420.500.11968/37272026-07-11 03:50:48.991open.accessoai:rad.ort.edu.uy:20.500.11968/3727https://rad.ort.edu.uyhttps://rad.ort.edu.uy/Universidadhttps://www.ort.edu.uy/https://rad.ort.edu.uy/server/oai/requestrodriguez_v@ort.edu.uyUruguayopendoar:39272026-07-11T06:50:48RAD - Universidad ORT Uruguayfalse
spellingShingle Optimización de la producción de un fragmento de leucotoxina recombinante
Demarco Guareschi, Ornella
PROYECTOS-BI
ENFERMEDADES DEL TRACTO RESPIRATORIO
PROTEÍNAS
TOXINAS MICROBIANAS
VACUNAS
GANADO
status_str publishedVersion
title Optimización de la producción de un fragmento de leucotoxina recombinante
title_full Optimización de la producción de un fragmento de leucotoxina recombinante
title_fullStr Optimización de la producción de un fragmento de leucotoxina recombinante
title_full_unstemmed Optimización de la producción de un fragmento de leucotoxina recombinante
title_short Optimización de la producción de un fragmento de leucotoxina recombinante
title_sort Optimización de la producción de un fragmento de leucotoxina recombinante
topic PROYECTOS-BI
ENFERMEDADES DEL TRACTO RESPIRATORIO
PROTEÍNAS
TOXINAS MICROBIANAS
VACUNAS
GANADO
url http://hdl.handle.net/20.500.11968/3727