El arroz (Oryza sativa L.) es un cultivo de gran importancia alimenticia siendo una fuente de carbohidratos para más de la mitad de la población mundial, por esto en las últimas décadas hubo un incremento en la productividad de este cultivo desarrollándose variedades de alto rendimiento. En el presente trabajo se efectuó la puesta a punto de la técnica del cultivo in vitro de anteras de arroz con el cometido de generar plantas duplo-haploides candidatas a ser líneas puras. Para ello se realizó la siembra de diez lotes de arroz de la variedad japónica, constituyendo una vez desarrolladas y cosechadas las plantas el material donante de anteras. Esta es una alternativa a las técnicas convencionales de fitomejoramiento que implican un tiempo extenso de ciclos de cruzamientos y selección de las mejores características de las variedades cruzadas. La técnica elegida permite también realizar un ahorro en cuanto a mano de obra, tierras y esfuerzo, ya que se elimina la siembra y la evaluación de líneas segregantes. Se obtuvieron tres líneas independientes las cuales fueron analizadas molecularmente mediante estudios de análisis de ploidía y marcadores moleculares. Los estudios por citometría de flujo, confirmaron su estado diploide, lo que indica una duplicación espontánea durante su multiplicación in vitro. Además se generó información sobre ocho caracteres moleculares con relación al porcentaje de grano partido, ancho del grano, contenido de amilosa, digestión alcalina, consistencia viscosa y resistencia a patógenos. Los resultados preliminares de los marcadores moleculares SSR revelan la presencia de polimorfismos entre las plantas generadas.