El Nuclear Factor Kappa-B (NF-kB) es un factor de transcripción que desempeña un papel clave en la regulación del sistema inmune. En células sin estimular, los complejos del NF-kB están inactivos en el citoplasma unido a proteínas inhibitorias IkBs. Su activación se produce por fosforilación del IkBα, disociándose del dímero NF-kB, migrando al núcleo, e induciendo la expresión de genes específicos. Los efectos pro/anti-inflamatorios de diferentes microorganismos y compuestos naturales o sintéticos, pueden vincularse con la modulación de la activación del NF-kB. En el presente trabajo se reporta la generación, caracterización y validación de un sistema de líneas celulares epiteliales intestinales reporteras de la activación del factor de transcripción NF-κB. Además, las mismas se evaluaron en presencia de microorganismos con capacidad inmunomoduladora, un péptido cíclico perteneciente a una biblioteca de compuestos naturales y un compuesto sintético derivado del tocoferol.