Optimización de la producción de poli-3-hidroxibutirato en Herbaspirillum seropedicae Z69 mediante la sobreexpresión de los genes: fba, tpiA o pgi
Resumen:
El presente trabajo final de carrera se centró en la creación de una cepa recombinante de Herbaspirillum seropedicae que sobreexpresa el gen pgi, así como en la evaluación de la producción de poli-3-hidroxibutirato (PHB) en esta cepa y en otras construidas previamente. La acumulación masiva de residuos plásticos en todo el mundo ha generado grandes preocupaciones y los plásticos biodegradables se presentan como una solución prometedora. Los polihidroxialcanoatos (PHAs) son biopolímeros sintetizados naturalmente por diversas bacterias, son biodegradables, biocompatibles y provienen de fuentes renovables. Sin embargo, su producción a gran escala es costosa. Las investigaciones en este campo se centran en el uso de sustratos baratos, en la optimización del proceso de fermentación, en la búsqueda de nuevas cepas bacterianas y en la introducción de modificaciones genéticas en las cepas productoras para mejorar su eficiencia mediante cambios en el metabolismo celular. El poli-3-hidroxibutirato (PHB) es el PHA más común y estudiado, y está compuesto por unidades de cuatro átomos de carbono. Herbaspirillum seropedicae es una bacteria β-proteobacteria Gram-negativa que acumula niveles significativos de PHB cuando se cultiva en presencia de glucosa como fuente de carbono. En este trabajo, se propuso la sobreexpresión de los genes fba (que codifica la fructosa-bifosfato aldolasa), tpiA (triosa fosfato isomerasa) y pgi (glucosa-6-fosfato isomerasa) con el objetivo de aumentar la eficiencia de la transformación de glucosa en PHB. Sin embargo, no se observaron diferencias entre las cepas recombinantes (Z69 (pBBR1MCS-2::tpiA), Z69 (pBBR1MCS-2::fba) y Z69 (pBBR1MCS-2::pgi)) y la cepa control en términos de crecimiento y producción de PHB. Estos resultados sugieren que, en las condiciones ensayadas, la sobreexpresión de una sola enzima no logró aumentar el flujo metabólico hacia la producción de PHB.
2023 | |
PROYECTOS-BI MICROBIOLOGÍA POLIHIDROXIALCANOATOS (PHA) BIOPLÁSTICOS POLÍMEROS |
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