Dada la emergencia y reemergencia de arbovirus como el virus Mayaro (MAYV) en la región y la presencia de su principal vector a nivel urbano, el mosquito Aedes aegypti, Uruguay se encuentra en riesgo constante. Por esta razón, es de interés hallar estrategiasde atenuación de estos virus con el fin de generar candidatos vacunales. Estudios previos evidencian que, a diferencia de los arbovirus (que replican alternadamente en insectos y vertebrados), los virus que únicamente infectan mosquitos presentan genomas con altas frecuencias relativas de CpGs. Además, se ha reportado que el incremento de la frecuencia de este dinucleótido puede activar de forma más eficiente la respuesta inmune en vertebrados, lo cual explica su sub-representación en virus ARN que infectan solamente vertebrados. Teniendo en cuenta esta información, en este trabajo se abordó una estrategia de atenuación viral basada en mutaciones sinónimas, con el objetivo de generar cepas de MAYV con altas frecuencias de CpGs, restringiendo su evolución hacia los hospederos invertebrados y dificultando su replicación en células de mamífero. Para esto se partió de un clon infeccioso wild type (WT) y se diseñaron tres clones infecciosos mutantes de MAYV, aumentando sus índices de CpGs en: toda la región codificante (FG+), exclusivamente en la región no estructural (NS+) y exclusivamente en la región estructural (S+). Se compararon las curvas de crecimiento (título viral vs. tiempo) en células A549 a una alta y baja multiplicidad de infección (MOI) y los resultados obtenidos mostraron valores mayores a un orden de diferencia entre WT y FG+, siendo WT el que mayores títulos virales presentó. Esto demuestra un cambio de fenotipo: el aumento de CpGs dificulta su replicación en células A549.