Diagnóstico molecular de Neospora caninum en fetos abortados espontáneamente en bovinos de Uruguay. [Molecular diagnosis of Neospora caninum in aborted bovine fetus from Uruguay.].

BRIANO, C. - REGIDOR-CERRILLO, J. - EASTON, C. - PIERUCCIONI, F. - ROMERO, A. - PERAZA, P. - MEDEROS, A. - DUTRA, F.

Resumen:

RESUMEN - En Uruguay el diagnóstico de rutina de Neospora caninum se realiza fundamentalmente por estudios histopatológicos de los fetos abortados complementando esta información con resultados deserología y/o Inmunohistoquímica (IHQ). El objetivo de este estudio fue estandarizar un protocolo de amplificación de secuencias mediante PCR (polymerase chain reaction) para la detección de Neospora caninum en órganos de fetos abortados espontáneamente en bovinos para su incorporación a la rutina diagnostica. Para dicho propósito se realizó un estudio retrospectivo utilizando muestras congeladas de archivo de un periodo comprendido entre el año 2013 y 2016, con diagnostico positivo o negativo a Neospora caninum. Los resultados mostraron que de 31 muestras positivas a Neospora caninum por las técnicas de rutina, 26 fueron positivas por PCR (84%), demostrando una alta sensibilidad de diagnóstico de la técnica. Todas las muestras con diagnostico negativo mediante histopatología (n=20) fueron confirmadas como negativo mediante PCR. La comparación de los resultados de PCR con los de histopatología, mediante el test de Cohen?s Kappa, indicó un acuerdo muy alto (81%, p<0.001) entre ambos diagnósticos. Dichos resultados sumados a la simplicidad y rapidez de la PCR podrían sugerir a la PCR como alternativo de la IHQ como técnica confirmatoria en el diagnóstico de rutina. También permite realizar análisis retrospectivos de muestras archivadas, paso fundamental para futuros estudios genéticos de la población de N. caninum presente en Uruguay.-.-.-.-.-.-.-.-.-.-.-.-.-.-.ABSTRACT - The diagnosis of Neospora caninum in Uruguay is carried out by histopathological studies of aborted fetuses, complementing this information with serology test and/or immunohistochemistry (IHC) results. The aim of this study was to standardize a protocol of polymerase chain reaction (PCR) to detect of N. caninum in organs of spontaneously aborted bovine fetus. A retrospective study was conducted using frozen samples from a period between 2013 and 2016, with positive or negative diagnosis of N. caninum. Results showed that 26 of 31 samples positives for N. caninum by routine techniques were positive by PCR, demonstrating a high sensitivity of the PCR. All negative samples by Histopathology (n=20) were confirmed as negative by PCR. Cohen?s Kappa test indicated a very high agreement (81%, p<0.001) between PCR and Histopathology with serology test and/or immunohistochemistry (IHC) results. The high sensitivity, specificity and simplicity of PCR test suggest this technique as an alternative to IHC as a confirmatory technique in routine diagnosis.

Detalles Bibliográficos
2021
DIAGNOSIS
DIAGNOSTICO
NEOSPORA CANINUM
PCR
Español
Instituto Nacional de Investigación Agropecuaria
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