Dilatación cervical en la oveja : efectos de tratamientos con análogos de oxitocina y de prostaglandina E2 de larga duración
Supervisor(es): Rodríguez Piñón, Marcelo - Tasende, Celia
Resumen:
El objetivo de esta Tesis fue determinar si la administración sola o combinada de análogos de oxitocina y prostaglandina E2 de larga acción (OxL y PGE2L) antes del momento esperado de la inseminación artificial (IA) aumenta la penetrabilidad y la degradación del colágeno cervical en ovejas. Para ello se sincronizó la ovulación de 40 ovejas Corriedale multíparas a través de la administración intravaginal de una esponja impregnada con 60 mg de acetato de medroxiprogesterona (MAP, Syntex, Buenos Aires, Argentina) por 13 días y la administración de 300 UI de gonadotrofina coriónica equina (eCG) i.m. (Novormon 5000®, Syntex, Buenos Aires, Argentina) al momento de retirar las esponjas (0 h). Las ovejas fueron adjudicadas a cuatro grupos experimentales de 10 animales cada uno, homogéneos de acuerdo a su peso corporal. A las 42 h post eCG (12 h antes del momento esperado de la IATF), cada grupo fue asignado de manera aleatoria a uno de cuatro tratamientos en un arreglo factorial 2x2. Los tratamientos fueron: grupo OxL, las ovejas recibieron 2 mL (40μg) i.m. de Carbetocina (Decomotón, Laboratorios Callier, Uruguay) y un dispositivo intravaginal placebo; grupo PGE2L, las ovejas recibieron 10 mg de Dinoprostone en un dispositivo intravaginal de liberación lenta (Cervidil, Propess®, Ferring Pharmaceuticals Ltd., West Drayton, UK) y 2 mL i.m. de solución salina; grupo OxL+PGE2L, las ovejas recibieron ambas hormonas administradas en simultáneo y de igual forma que lo descrito previamente para los grupos OxL y PGE2L y grupo Control las ovejas recibieron 2 mL de solucion salina i.m. y un dispositivo intravaginal placebo. La penetrabilidad cervical se midió a las 0, 42 y 54 h post eCG, en todos los animales. Al momento esperado de la IA (54 h post eCG), se eligirieron al azar la mitad de los animales de cada grupo y se sacrificaron para la obtención del cérvix. La determinación del contenido de colágeno y de la actividad gelatinolítica de las formas activada y latente de las metaloproteinasas de la matriz extracelular -2 y-9 (MMP-2 y MMP-9, respectivamente) se realizó por espectofotometría y zimografía en gel de poliacrilamida co-polimerizado con gelatina, respectivamente, en muestras de cérvix craneal y caudal previamente homogenizadas. Para conocer el momento de la ovulación, se realizaron ecografías seriadas de ambos ovarios por vía transrectal a las 12, 20, 28, 36, 42, 48 y 54 h post eCG. Treinta y cuatro de los cuarenta animales ovularon antes de la administración de los tratamientos con PGE2L y/o OxL (42 h post eCG). Los seis animales que ovularon luego de los tratamientos fueron eliminados de los análisis estadísticos de todas las variables estudiadas en esta tesis. Para el análisis de los datos se utilizó un Análisis de Varianza 2x2 (ANOVA) de SAS (Statistical Analysis Systems SAS Institute, 2000; Carolina del Norte, EUA). El Log (n+1) de la penetrabilidad cervical fue afectada por la h post eCG (P <0,0001, n=34) y por la interacción entre los tratamientos y la h post eCG (P=0,03, n=34). En todos los grupos experimentales la penetrabilidad cervical aumentó desde la administración de la eCG (0 h post eCG) hasta el momento de la administración de los tratamientos experimentales (42 h post eCG) (P<0,0029), sin diferencias entre grupos. Desde la administración de los tratamientos hasta el momento esperado de la IATF (54 h post eCG) se detectó una disminución de la penetrabilidad cervical en el grupo Control (P= 0,0207) que no fue detectada en los grupos tratados. A las 54 h post eCG, la penetrabilidad cervical fue mayor en todos los grupos tratados comparada con el Control a la misma hora, sin diferencias entre ellos (P< 0,0373). La concentración del colágeno cervical (mg/g de tejido seco) fue afectada por el tratamiento con PGE2L (n= 17; P= 0,03) y la interacción del tratamiento con OxL y PGE2L (n=17; P=0,002). Además, se detectó una interacción del tratamiento con OxL y PGE2L y la zona cervical (n= 17; P=0,04). En la zona caudal la concentración del colágeno fue menor en el grupo OxL comparada con el grupo Control (P=0,006) y con el grupo OxL+PGE2L (P= 0,002). La concentración del colágeno en el grupo PGE2L fue menor con respecto al grupo OxL+PGE2L (P=0,019) y tendió a ser menor con respecto al grupo Control (P=0,062). La actividad de la forma activada de la MMP-2 fue afectada por el tratamiento con OxL (P=0,04, n=17), pero no por el tratamiento con PGE2L u OxL+PGE2L. La actividad de la forma activada de la MMP-2 (ng/mg de proteínas) fue mayor en los animales tratados con OxL con respecto a los animales no tratados con OxL (incluyen los grupos Control y PGE2L) (n=17; P=0,04,). En conclusión la administración de OxL, PGE2L y su combinación en ovejas Corriedale prolongó en el tiempo el incremento de la penetrabilidad cervical generada en respuesta al tratamiento con MAP y eCG, específicamente en el período comprendido entre las 42 y las 54 h post eCG. Como resultado, al momento esperado de la IATF (54 h post eCG), todos los animales tratados tuvieron mayor penetrabilidad cervical que los animales controles, sin presentar diferencias entre sí. Los efectos de la OxL sobre la penetrabilidad cervical podrían explicarse en parte por un aumento de la degradación del colágeno mediada por la MMP-2, mientras que la PGE2 actuaría fundamentalmente a través de un mecanismo diferente a la degradación del colágeno.
2019 | |
OVEJAS OVINOS CUELLO UTERINO |
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Español | |
Universidad de la República | |
COLIBRI | |
https://hdl.handle.net/20.500.12008/35830 | |
Acceso abierto | |
Licencia Creative Commons Atribución - No Comercial - Sin Derivadas (CC - By-NC-ND 4.0) |
Sumario: | El objetivo de esta Tesis fue determinar si la administración sola o combinada de análogos de oxitocina y prostaglandina E2 de larga acción (OxL y PGE2L) antes del momento esperado de la inseminación artificial (IA) aumenta la penetrabilidad y la degradación del colágeno cervical en ovejas. Para ello se sincronizó la ovulación de 40 ovejas Corriedale multíparas a través de la administración intravaginal de una esponja impregnada con 60 mg de acetato de medroxiprogesterona (MAP, Syntex, Buenos Aires, Argentina) por 13 días y la administración de 300 UI de gonadotrofina coriónica equina (eCG) i.m. (Novormon 5000®, Syntex, Buenos Aires, Argentina) al momento de retirar las esponjas (0 h). Las ovejas fueron adjudicadas a cuatro grupos experimentales de 10 animales cada uno, homogéneos de acuerdo a su peso corporal. A las 42 h post eCG (12 h antes del momento esperado de la IATF), cada grupo fue asignado de manera aleatoria a uno de cuatro tratamientos en un arreglo factorial 2x2. Los tratamientos fueron: grupo OxL, las ovejas recibieron 2 mL (40μg) i.m. de Carbetocina (Decomotón, Laboratorios Callier, Uruguay) y un dispositivo intravaginal placebo; grupo PGE2L, las ovejas recibieron 10 mg de Dinoprostone en un dispositivo intravaginal de liberación lenta (Cervidil, Propess®, Ferring Pharmaceuticals Ltd., West Drayton, UK) y 2 mL i.m. de solución salina; grupo OxL+PGE2L, las ovejas recibieron ambas hormonas administradas en simultáneo y de igual forma que lo descrito previamente para los grupos OxL y PGE2L y grupo Control las ovejas recibieron 2 mL de solucion salina i.m. y un dispositivo intravaginal placebo. La penetrabilidad cervical se midió a las 0, 42 y 54 h post eCG, en todos los animales. Al momento esperado de la IA (54 h post eCG), se eligirieron al azar la mitad de los animales de cada grupo y se sacrificaron para la obtención del cérvix. La determinación del contenido de colágeno y de la actividad gelatinolítica de las formas activada y latente de las metaloproteinasas de la matriz extracelular -2 y-9 (MMP-2 y MMP-9, respectivamente) se realizó por espectofotometría y zimografía en gel de poliacrilamida co-polimerizado con gelatina, respectivamente, en muestras de cérvix craneal y caudal previamente homogenizadas. Para conocer el momento de la ovulación, se realizaron ecografías seriadas de ambos ovarios por vía transrectal a las 12, 20, 28, 36, 42, 48 y 54 h post eCG. Treinta y cuatro de los cuarenta animales ovularon antes de la administración de los tratamientos con PGE2L y/o OxL (42 h post eCG). Los seis animales que ovularon luego de los tratamientos fueron eliminados de los análisis estadísticos de todas las variables estudiadas en esta tesis. Para el análisis de los datos se utilizó un Análisis de Varianza 2x2 (ANOVA) de SAS (Statistical Analysis Systems SAS Institute, 2000; Carolina del Norte, EUA). El Log (n+1) de la penetrabilidad cervical fue afectada por la h post eCG (P <0,0001, n=34) y por la interacción entre los tratamientos y la h post eCG (P=0,03, n=34). En todos los grupos experimentales la penetrabilidad cervical aumentó desde la administración de la eCG (0 h post eCG) hasta el momento de la administración de los tratamientos experimentales (42 h post eCG) (P<0,0029), sin diferencias entre grupos. Desde la administración de los tratamientos hasta el momento esperado de la IATF (54 h post eCG) se detectó una disminución de la penetrabilidad cervical en el grupo Control (P= 0,0207) que no fue detectada en los grupos tratados. A las 54 h post eCG, la penetrabilidad cervical fue mayor en todos los grupos tratados comparada con el Control a la misma hora, sin diferencias entre ellos (P< 0,0373). La concentración del colágeno cervical (mg/g de tejido seco) fue afectada por el tratamiento con PGE2L (n= 17; P= 0,03) y la interacción del tratamiento con OxL y PGE2L (n=17; P=0,002). Además, se detectó una interacción del tratamiento con OxL y PGE2L y la zona cervical (n= 17; P=0,04). En la zona caudal la concentración del colágeno fue menor en el grupo OxL comparada con el grupo Control (P=0,006) y con el grupo OxL+PGE2L (P= 0,002). La concentración del colágeno en el grupo PGE2L fue menor con respecto al grupo OxL+PGE2L (P=0,019) y tendió a ser menor con respecto al grupo Control (P=0,062). La actividad de la forma activada de la MMP-2 fue afectada por el tratamiento con OxL (P=0,04, n=17), pero no por el tratamiento con PGE2L u OxL+PGE2L. La actividad de la forma activada de la MMP-2 (ng/mg de proteínas) fue mayor en los animales tratados con OxL con respecto a los animales no tratados con OxL (incluyen los grupos Control y PGE2L) (n=17; P=0,04,). En conclusión la administración de OxL, PGE2L y su combinación en ovejas Corriedale prolongó en el tiempo el incremento de la penetrabilidad cervical generada en respuesta al tratamiento con MAP y eCG, específicamente en el período comprendido entre las 42 y las 54 h post eCG. Como resultado, al momento esperado de la IATF (54 h post eCG), todos los animales tratados tuvieron mayor penetrabilidad cervical que los animales controles, sin presentar diferencias entre sí. Los efectos de la OxL sobre la penetrabilidad cervical podrían explicarse en parte por un aumento de la degradación del colágeno mediada por la MMP-2, mientras que la PGE2 actuaría fundamentalmente a través de un mecanismo diferente a la degradación del colágeno. |
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