La tristeza parasitaria bovina (TPB) es un complejo de enfermedades que causa importantes pérdidas económicas en la ganadería de nuestro país. Este complejo está compuesto por dos enfermedades, una es la babesiosis, causada por dos protozoarios, Babesia bovis y Babesia bigemina, y la otra enfermedad, anaplasmosis cuyo agente es una rickettsia, Anaplasma marginale. Ambos agentes invaden los eritrocitos causando su destrucción, provocando anemia y desórdenes vasculares que conllevan a la muerte. En Uruguay, el diagnóstico en animales enfermos se realiza por visualización de frotis, pero ésta tiene limitantes en su sensibilidad. El primer objetivo del presente estudio fue fortalecer el diagnóstico de los brotes de TPB, desarrollando e implementando una prueba de la reacción en cadena de la polimerasa multiplex a tiempo final (PCRm). El segundo objetivo se basó en el estudio descriptivo de los brotes de TPB. Se realizó un muestreo de conveniencia con muestras provenientes de rodeos con signos compatibles a TPB, las cuales fueron remitidas por veterinarios de libre ejercicio al Laboratorio DILAVE-MGAP, Paysandú. Se obtuvieron muestras de 152 brotes presuntivos a TPB, pertenecientes a 10 departamentos del Uruguay. Se trabajó con 375 animales de los cuales se extrajeron: 340 muestras de sangre y 127 órganos entre ellos bazo, corazón, hígado, riñón y sistema nervioso central. Por cada brote, se recolectó información epidemiológica (lugar, fecha de ocurrencia, categoría, número de animales enfermos y muertos), signos clínicos, hallazgos de necropsia, presencia de garrapatas y manejos sanitarios que involucraron inyectables. El diagnóstico fue abordado de forma multifactorial, tomando aspectos epidemiológicos, clínicos, hallazgos de necropsia y técnicas de laboratorio. Se realizó frotis coloreados con Giemsa y análisis de microhematocrito. Así mismo, se desarrolló una PCR multiplex (PCRm) para la detección de los tres agentes. Se estableció para esta nueva PCRm: límite de detección y robustez (congelación y autolisis de las muestras). La sensibilidad y especificidad fue calculada para ambas técnicas (frotis: 73%, 98% y PCRm: 99%, 72.3%). El 63% (96/152) de los brotes fueron positivos a los agentes de TPB, siendo 43% A. marginale, 22% Babesia bovis, 22% B. bigemina y 13% infecciones mixtas. Se establecieron los indicadores de morbilidad, mortalidad y letalidad. Se realizaron 340 análisis de microhematocrito, siendo 136 positivos (frotis y PCRm) a al menos un agente, obteniendo porcentajes de anemia inferiores a 26%. La categoría más afectada fue la vaca. Los signos clínicos con una asociación significativa fueron: anemia, mucosas pálidas, emaciación, fiebre, ictericia, ataxia y agresividad. Mientras que los hallazgos de necropsia con una asociación significativa: esplenomegalia, anemia, ictericia, hígado de color anaranjado. La curva epidemiológica de los agentes de la TPB, estableció una clara estacionalidad en los brotes de babesiosis en los meses de verano y principalmente, en otoño, siendo la presencia de Rhipicephalus microplus el factor de riesgo principal para la presentación de babesiosis. Para anaplasmosis, se registraron casos a lo largo de todo el año, siendo la utilización de inyectables la causa más probable de transmisión de A. marginale. Para concluir, las pruebas diagnósticas reflejaron poseer diferentes ventajas y limitaciones. Por lo cual, se considera que el frotis y PCRm deberían ser utilizadas conjuntamente en Uruguay, tanto con fines diagnósticos, como en investigaciones epidemiológicas.