El programa de mejoramiento genético del Instituto Nacional de Investigación Agropecuaria (INIA, Uruguay) para Eucalyptus globulus y E. maidenii tiene como objetivo superar los problemas sanitarios y mejorar la baja capacidad de enraizamiento de estas especies. Esto mediante la selección de clones con un temprano cambio de follaje y cruzamientos interespecíficos entre E. grandis x E. globulus y E. grandis x E. maidenii, aprovechando la resistencia y la mayor capacidad de enraizamiento de E. grandis. Los clones del programa de mejoramiento se propagan mediante micropropagación, pero su limitada capacidad de enraizamiento y la baja sobrevivencia ex vitro dificultan su multiplicación. Con el objetivo de optimizar los protocolos de micropropagación y aclimatación de E. globulus e híbridos, se evaluó el suministro de diferentes tipos y concentraciones de citoquininas al medio de multiplicación. Además, se evaluó el uso de agentes microbianos durante el trasplante, a partir del desarrollo de celdas de crecimiento y condiciones óptimas de invernáculo. El suministro de metatopolina (mT) al medio de multiplicación mejoró la multiplicación y enraizamiento in vitro, con incrementos en las tasas de proliferación y elongación de los explantes, así como el porcentaje de enraizamiento y la calidad de raíz. Asimismo, la mejor calidad de planta in vitro obtenida con mT favoreció la aclimatación, con mayores porcentajes de supervivencia, altura y longitud de raíces. Por otro lado, la inoculación con dos cepas de Azospirillum brasilense y una cepa Trichoderma asperellum favoreció el crecimiento durante la aclimatación, lo que se reflejó en una mayor altura de planta y una mayor longitud de raíces principales y laterales. Estos resultados permitieron mejorar la eficiencia del protocolo de micropropagación, mediante el uso de mT, y el ajuste de las condiciones de aclimatación mediante la aplicación de agentes microbianos y el uso de celdas de crecimiento en condiciones de invernáculo.