La oxitocina (OT) es una hormona neuropéptídica que modula varios comportamientos sociales y puede afectar la respuesta de ansiedad y estrés. El objetivo de este estudio fue determinar si la administración de OT intranasal afecta la respuesta de estrés al aislamiento social en ovejas. Para eso se asignaron veinte ovejas de raza Merino Australiano adultas a dos grupos: 1) grupo control (GC, n = 10), al que se le administró una solución salina isotónica por vía intranasal y 2) grupo tratado con oxitocina (GOT, n = 10), el que recibió OT por vía intranasal (24 UI). Ambos grupos recibieron la dosificación correspondiente 40 min antes de ser colocados en la prueba de aislamiento social. Durante la prueba de aislamiento social (10 min), se registró el comportamiento de las ovejas y se obtuvieron muestras de sangre antes y después de la prueba para la determinación de cortisol, glucosa y proteínas séricas, y se registró la frecuencia cardíaca y la temperatura superficial en la zona de proyección cardíaca. Las ovejas GOT tuvieron una mayor concentración de cortisol (P = 0,04) después del aislamiento social, tendieron a vocalizar más (P = 0,06) durante la prueba de aislamiento, y tendían a tener concentraciones de globulina más bajas (P = 0,10) que las ovejas GC. La administración de OT intranasal aumentó la respuesta de estrés al aislamiento social en las ovejas, lo cual se evidenció por cambios a nivel endocrino, y probablemente cambios fisiológicos y comportamentales.