Introducción: A pesar de la existencia de pautas internacionales sobre profilaxis postexposición no ocupacional (PPENO) al VIH en varios países del mundo, Uruguay no tiene pautas nacionales actualmente y no hay registro sobre su uso. Debido a la eficacia demostrada en los estudios, y la prevalencia de VIH en Uruguay, el uso de esta estrategia podría disminuir la incidencia en el país. Objetivo: Profundizar en el conocimiento y prácticas locales con respecto a profilaxis postexposición no ocupacional al VIH en diferentes grupos poblacionales (médicos, estudiantes de medicina, integrantes de las organizaciones de la sociedad civil relacionadas al tema, personas con VIH e infectólogos) durante el período mayo-octubre del 2015. Métodos: Se diseñó un estudio descriptivo transversal en el período abril - octubre de 2015 que consistió en la realización de encuestas con preguntas precodificadas. Los datos obtenidos se analizaron utilizando medidas de tendencia central. Resultados: El 100% de los infectólogos conocían la PPENO mientras que en los médicos y estudiantes de medicina el conocimiento disminuyó a 73% y 66% respectivamente. Por otro lado, las Organizaciones de la Sociedad Civil respondieron afirmativamente en un 61% y las personas con VIH en un 26%. Sobre la aplicación de la PPENO, en los grupos de médicos, infectólogos y estudiantes se destacó que el 47% de los infectólogos, el 14% de los estudiantes de medicina y el 3% de los médicos responden correctamente cómo aplicarla. El 100% de los médicos y estudiantes de medicina considera importante la creación de pautas nacionales mientras que en los infectólogos la cifra fue de 94%. Conclusiones: Debería existir y aplicarse una pauta sobre PPENO al VIH a nivel nacional que sea elaborada por los Infectólogos de Uruguay. También se debería capacitar principalmente al personal médico del primer nivel de atención y servicios de emergencia ya que son la puerta de entrada al sistema de salud.