Nueva evidencia ha revelado que la principal forma de acción del bloqueo del eje PD-1/PD-L1 es a través de la reversión de la inhibición de las células dendríticas (DC) licenciándolas para promover la continua activación de las células T de memoria progenitoras CD8+ exhaustas (Tpex), surtiendo así al tumor con células efectoras, que, si bien heredan el perfil exhausto, tienen una potente actividad antitumoral. Sobre esta base, en esta tesis exploramos la potenciación de la actividad antitumoral de los anticuerpos anti-PD-L1 mediante su direccionamiento a células dendríticas (DC) al combinarlos con un nanobody (Nb) anti-CD11c. Como referencia, además del Nb biespecífico (b-Nb) anti-CD11c/anti-PD-L1, nos propusimos generar un b-Nb anti-CD3/anti-PD-L1, dado que esta combinación ha mostrado una potente actividad antitumoral. Desafortunadamente, si bien se produjo un antígeno recombinante, CD3γ, formado por la fusión de los ectodominios CD3 y CD3γ a través de una secuencia peptídica, ninguno de los Nbs anti- CD3γ aislados reconocieron al receptor CD3 nativo en células T. La actividad anti-tumoral del b-Nb anti-CD11c/anti-PD-L1 se evaluó en modelos murinos de melanoma y carcinoma de colon, utilizando el b-Nb E5/anti-PD-L1 como control, donde E5 representa una Nb irrelevante. Para ambas combinaciones se generaron las versiones bivalentes fusionadas a la región Fc de la IgG2a de ratón (con una mutación LALA que reduce funciones efectoras) con el fin de extender la vida media de las mismas. Se observó una potenciación del efecto terapéutico del bloqueo de PD-L1 cuando este se combinaba con el Nb anti-CD11c, mostrando diferencias significativas tanto a nivel del retardo del crecimiento tumoral como en la prolongación de la sobrevida de los individuos. Este hecho se correlacionó con lo visto en la inmunofenotipificación donde se destacó el aumento relativo en el porcentaje de linfocitos T CD8+ y CD4+ en el tumor. A la vez que se observó un aumento en la proliferación de linfocitos T CD8+ en el ganglio drenante. Si bien a nivel del tumor la expresión de PD-L1 fue similar, se vio una marcada disminución de su expresión a nivel de las células dendríticas en el ganglio drenante en el grupo tratado con el b-Nb anti-CD11c/anti-PD-L1. Este resultado coincide con lo observado in vitro con células dendríticas derivadas de médula ósea, que estaría mostrando que la unión simultánea a CD11c potencia el bloqueo de PD-L1, liberando la capacidad activadora de las células dendríticas y mejorando de esta forma la eficacia de la inmunoterapia con estos fármacos.