Caracterización de bacterias aeromonadales móviles aisladas de peces cultivados en Uruguay
Supervisor(es): Zunino, Pablo - Antúnez, Karina
Resumen:
Las bacterias aeromonadales móviles se ubican entre los patógenos más importantes para la salud de los sistemas de acuicultura de agua dulce a nivel mundial, siendo responsables de epizootias con mortandades masivas de peces en cortos períodos de tiempo que afectan de manera drástica la economía de las piscigranjas a cualquier escala. Son consideradas a su vez agentes zoonóticos de creciente relevancia dado que a partir de síndromes intestinales o infecciones extraintestinales son capaces de alterar de manera grave la salud del paciente humano. A pesar de la relevancia que poseen estos microorganismos existen varias discrepancias en aspectos relacionados con la identificación de especies y la caracterización de cepas o patotipos diferentes. Distintos miembros del género Aeromonas han sido identificados en nuestro país como el agente infeccioso más prevalente entre los peces de cultivo, ya sea con destino al consumo humano u ornamentales. El objetivo de esta tesis fue caracterizar las cepas de Aeromonas móviles aisladas de peces cultivados en nuestro país desde el punto de vista fenotípico, genético y patológico. Para ello se emplearon 33 aislamientos de Aeromonas spp. obtenidos de distintas especies de peces provenientes de diversos sistemas de cultivo. Además de ser identificados a nivel bioquímico (kit API 20NE®) y molecular (secuenciación de los genes ARNr 16S y gyrB), se evaluó en cada aislamiento la susceptibilidad a diez antibióticos (amoxicilina ácido clavulánico, ampicilina con y sin dicloxacilina, enrofloxacina, eritromicina, nitrofurantoína, oxitetraciclina, penicilina, sulfametoxazole trimetoprim y tiamfenicol) y la presencia/ausencia de cinco genes de virulencia (act, alt, ast, ela y lip). Se llevó a cabo a su vez una caracterización global del genoma de cada aislamiento mediante técnicas rep-PCR empleando los primers BOX, ERIC y REP y un estudio filogenético utilizando las secuencias de los genes ARNr 16S y gyrB. La virulencia de los aislamientos más representativos se determinó mediante cálculo de dosis letal cincuenta en peces (Australoheros facetus). Se identificaron por primera vez para el país las especies A. llosacharophila, A. bestiarium y A. punctata; siendo Aeromonas hydrophila y A. veronii las especies con mayor prevalencia (38,2% y 32,4% respectivamente). Todos los aislamientos fueron resistentes a por lo menos tres de los antibióticos evaluados, detectándose multirresistencia en el 82,3% de los mismos. Se identificaron diez genotipos de virulencia diferentes, correlacionados con la especie de Aeromonas que lo posee y la actividad hemolítica del aislamiento. A. allosaccharophila, A. bestiarium y A. punctata presentan estabilidad en la distribución de sus genes de virulencia. El genotipo act+ /alt+ /ast+ /ela+ /lip+ fue el más prevalente (26,5%). Los distintos aislamientos de A. punctata poseen estructura clonal para las técnicas de tipificación genómica usadas, mientras que el resto de las especies poseen elevada diversidad genética. La virulencia de los aislamientos de aeromonadales móviles fue proporcional a la cantidad de genes de virulencia que poseen.
2016 | |
BACTERIAS PECES AEROMONAS ACUICULTURA URUGUAY |
|
Español | |
Universidad de la República | |
COLIBRI | |
https://hdl.handle.net/20.500.12008/24005 | |
Acceso abierto | |
Licencia Creative Commons Atribución - No Comercial - Sin Derivadas (CC - By-NC-ND 4.0) |
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A pesar de la relevancia que poseen estos microorganismos existen varias discrepancias en aspectos relacionados con la identificación de especies y la caracterización de cepas o patotipos diferentes. Distintos miembros del género Aeromonas han sido identificados en nuestro país como el agente infeccioso más prevalente entre los peces de cultivo, ya sea con destino al consumo humano u ornamentales. El objetivo de esta tesis fue caracterizar las cepas de Aeromonas móviles aisladas de peces cultivados en nuestro país desde el punto de vista fenotípico, genético y patológico. Para ello se emplearon 33 aislamientos de Aeromonas spp. obtenidos de distintas especies de peces provenientes de diversos sistemas de cultivo. Además de ser identificados a nivel bioquímico (kit API 20NE®) y molecular (secuenciación de los genes ARNr 16S y gyrB), se evaluó en cada aislamiento la susceptibilidad a diez antibióticos (amoxicilina ácido clavulánico, ampicilina con y sin dicloxacilina, enrofloxacina, eritromicina, nitrofurantoína, oxitetraciclina, penicilina, sulfametoxazole trimetoprim y tiamfenicol) y la presencia/ausencia de cinco genes de virulencia (act, alt, ast, ela y lip). Se llevó a cabo a su vez una caracterización global del genoma de cada aislamiento mediante técnicas rep-PCR empleando los primers BOX, ERIC y REP y un estudio filogenético utilizando las secuencias de los genes ARNr 16S y gyrB. La virulencia de los aislamientos más representativos se determinó mediante cálculo de dosis letal cincuenta en peces (Australoheros facetus). Se identificaron por primera vez para el país las especies A. llosacharophila, A. bestiarium y A. punctata; siendo Aeromonas hydrophila y A. veronii las especies con mayor prevalencia (38,2% y 32,4% respectivamente). Todos los aislamientos fueron resistentes a por lo menos tres de los antibióticos evaluados, detectándose multirresistencia en el 82,3% de los mismos. Se identificaron diez genotipos de virulencia diferentes, correlacionados con la especie de Aeromonas que lo posee y la actividad hemolítica del aislamiento. A. allosaccharophila, A. bestiarium y A. punctata presentan estabilidad en la distribución de sus genes de virulencia. El genotipo act+ /alt+ /ast+ /ela+ /lip+ fue el más prevalente (26,5%). Los distintos aislamientos de A. punctata poseen estructura clonal para las técnicas de tipificación genómica usadas, mientras que el resto de las especies poseen elevada diversidad genética. 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Nº 16 de C.D.C. de 07/10/2014)info:eu-repo/semantics/openAccessLicencia Creative Commons Atribución - No Comercial - Sin Derivadas (CC - By-NC-ND 4.0)BACTERIASPECESAEROMONASACUICULTURAURUGUAYCaracterización de bacterias aeromonadales móviles aisladas de peces cultivados en UruguayTesis de maestríainfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/acceptedVersionreponame:COLIBRIinstname:Universidad de la Repúblicainstacron:Universidad de la RepúblicaPerretta, AlejandroZunino, PabloAntúnez, KarinaUniversidad de la República (Uruguay). 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